调整好氮气钢瓶所需压力（钢瓶上减压阀的输出压力），一般为0.1左右。打开控制面板上的F2开关，同时打开真空泵开关，让其抽走过取样室的空气。氮气充入操作室内，以手套向外伸直为止（不能过多充入，小心手套爆裂。），此时应立即关闭F2开关。然后打开F3与F4的开关，使操作室内的气过渡到过道室，直到手套向内伸直为止，为防止手套爆裂，此时应马上关闭F3与F4的开关，这样氮气的一次置换完成了，重复以上方法，做5到6次，做完后，整个氮气的置换就完成了，关闭减压阀和钢瓶总阀。
混合气体的置换方法：调整好混合气体钢瓶所需压力（钢瓶上减压阀的输出压力），一般为0.1左右。打开控制面板上的F3开关，同时打开真空泵开关，让其抽走取样室内的空气。混合气充入操作室内，以手套向外伸直为止（不能过多充入，为防止手套爆裂。），此时应立即关闭F3开关，然后打开F1和F2开关，使操作室内的气过渡到取样室内，直到手套向内伸直为止，为防止手套爆裂此时应立即关闭F1与F2的开关，这样混合气的一次置换完成了，重复以上方法，做5到6次，做完后，整个气体的置换就完成了，这时操作室内就形成了厌氧环境，并关闭真空泵开关。打开F5，并调节面板上的稳流阀和流量计，使流量计的流量为10ml/min。直至全部实验结束，关闭减压阀和混合气总阀。
真正达到所需厌氧状态，还需用钯粒分筛来吸收操作室内的剩余氧分子，最后用指示条（指示条的蓝色上加一滴纯水）来测量操作室是否还有氧，指示条变色表明已经是厌氧环境了，此时就可以进行厌氧菌的培养了。
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