以下是凝胶色谱仪的基本使用步骤的介绍,通过学习和掌握这些方法,用户可以更好地操作凝胶色谱仪,并取得较好的实验结果。
一、样品准备
1. 准备样品并将其过滤以去除颗粒物和悬浮物。
2. 根据样品的特性和需要选择合适的洗脱缓冲液,并将其冷藏备用。
二、样品装载
1. 安装好凝胶色谱柱并连接好色谱系统后,将洗脱缓冲液加入色谱柱中。
2. 转载固定相并预平衡至少30分钟。
3. 以小样品量进行预试以确定洗脱参数。根据不同的分离需求选择合适的实验条件以及最终采集和分析。
三、运行条件设置
1. 根据样品的特性和需要选择合适的洗脱缓冲液。
2. 根据洗脱缓冲液的种类和性质以及样品的特性设置好运行条件。
3. 确定样品质量。
四、运行
1. 将样品导入样品进样瓶中。
2. 连接样品进样瓶和凝胶色谱柱。
3. 开一些灌流缓冲液,把瓶子放在样品进样器上,并开启泵头。
4. 在运行期间应应用适当条件以防止杂质及内部矛盾问题。
五、结果分析
1. 通过分析凝胶色谱的结果,确定样品中各种分子的如数量、质量、结构等信息。
2. 通过不同的定量和定性分析方法获得需要的数据,包括质谱分析、氨基酸分析等。
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