杜马斯燃烧法定氮仪通过高温燃烧将样品中的氮元素转化为氮气,并经还原、净化和检测等步骤实现总氮含量的精准测定。该方法无需强酸强碱,分析速度快(3–8分钟/样),且能测定包括硝态氮在内的所有形态氮,已成为现代实验室高效检测的重要手段。
操作步骤如下:
1.仪器准备与校准
开启杜马斯定氮仪,进行预热至稳定工作温度(通常燃烧炉达900–1200°C)。运行前需完成系统检漏和载气(如氦气或氧气)压力检查。随后使用标准含氮物质(如乙二胺四乙酸、天冬氨酸等)制作标准曲线:称取不同浓度标准品,测定其氮气响应信号(峰面积),以总氮含量为横坐标、信号值为纵坐标绘制校准曲线,要求相关系数≥0.999。日常使用中每20个样品或每批次需做中间标准核查,校正因子应在0.9–1.1之间,否则需重新标定。
2.样品制备
固体样品需粉碎并过筛(孔径0.8–1 mm),确保均匀性。准确称取适量样品(一般50–300 mg,精确至0.01 mg)放入锡箔杯或无氮容器中。对于液体样品,可移取一定体积(精确至0.01 mL)加入吸附剂(如石英砂)中充分吸附后再封装。同时准备空白对照(如蔗糖或锡箔空样)以扣除背景干扰。
3.样品测定
将装好样品的容器置于自动进样盘,设置程序启动分析。样品在高纯氧环境中进入高温燃烧管(>900°C),有机物W全氧化生成CO₂、H₂O和NOx等气体。燃烧产物经干燥除水后,进入还原管(含铜粉或钨催化剂,约800°C),NOx被还原为N₂,过量氧气也被消耗。随后气体再次通过干燥和CO₂吸附装置(如碱石棉),仅保留纯净N₂随载气进入热导检测器(TCD)。TCD根据氮气热导率变化输出电信号,仪器自动比对校准曲线计算出氮含量。
4.结果计算与质量控制
测定结果以两次平行样的算术平均值表示,精密度要求两次独立测定结果的J对差值不超过平均值的10%。蛋白质含量可通过换算系数F计算:蛋白质含量 = 氮含量 × F,常用系数为6.25(乳制品、谷物、肉类等则使用特定值)。每批样品应包含不少于20%的平行样,若样品数≤5,则至少做1个平行测定以保证数据可靠性。
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